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Evaluierung und Weiterentwicklung eines phänotypischen Resistenzassays der HIV-Protease
Evaluierung und Weiterentwicklung eines phänotypischen Resistenzassays der HIV-Protease
Am Max von Pettenkofer-Institut wurde ein enzymkinetischer Assay der HIV-Protease entwickelt. Nach spezifischer Amplifikation des Genoms der HIV-Protease aus Blut infizierter Patienten wird das Enzym rekombinant exprimiert und seine Aktivität in Gegenwart verschiedener Inhibitorkonzentrationen mithilfe eines künstlichen Substrates in einem Fluoreszenzassay ermittelt. Ein Vergleich mit Wildtyprotease erlaubt die Berechnung anschaulicher Resistenzfaktoren. Insbesondere hinsichtlich Geschwindigkeit, Kosten und Spezifität stellt das System eine attraktive Alternative zu den bekannten Verfahren dar.
HIV,Protease,Resistenz,phänotypische Resistenztestung, genotypische Resistenztestung,HAART,AIDS
Müller-Sarnowski, Felix
2007
German
Universitätsbibliothek der Ludwig-Maximilians-Universität München
Müller-Sarnowski, Felix (2007): Evaluierung und Weiterentwicklung eines phänotypischen Resistenzassays der HIV-Protease. Dissertation, LMU München: Faculty of Medicine
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Abstract

Am Max von Pettenkofer-Institut wurde ein enzymkinetischer Assay der HIV-Protease entwickelt. Nach spezifischer Amplifikation des Genoms der HIV-Protease aus Blut infizierter Patienten wird das Enzym rekombinant exprimiert und seine Aktivität in Gegenwart verschiedener Inhibitorkonzentrationen mithilfe eines künstlichen Substrates in einem Fluoreszenzassay ermittelt. Ein Vergleich mit Wildtyprotease erlaubt die Berechnung anschaulicher Resistenzfaktoren. Insbesondere hinsichtlich Geschwindigkeit, Kosten und Spezifität stellt das System eine attraktive Alternative zu den bekannten Verfahren dar.