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Rasterelektronenmikroskopische und immunhistochemische Untersuchungen am Eileiter vom Schwein während Zyklus und Trächtigkeit
Rasterelektronenmikroskopische und immunhistochemische Untersuchungen am Eileiter vom Schwein während Zyklus und Trächtigkeit
In der vorliegenden Arbeit wurden zum einen mit Hilfe des Rasterelektronenmikroskops die morphologischen Veränderungen des Eileiterepithels und zum anderen die Expression hypophysärer wachstums- und proliferationsfördernder Hormone und ihrer Rezeptoren immunhistochemisch und mit der Reverse Transkriptase (RT)-PCR sowohl im Verlauf des Zyklus als auch der Trächtigkeit analysiert. Hierfür wurden, von 24 Schweinen der Deutschen Landrasse, die drei Abschnitte des Eileiters (Infundibulum, Ampulle, Isthmus) in jeweils vier verschiedenen Zyklus- und Trächtigkeitsstadien untersucht. Dazu wurden Proben im Östrus, Metöstrus, Diöstrus und Proöstrus sowie am 2.-3. Tag post inseminationem, 14., 23. und 65.-71. Trächtigkeitstag entnommen. Des Weiteren erfolgte die Dokumentation des morphologischen und histologischen Aufbaus des uterotubalen Übergangs beim Schwein, anhand rasterelektronen- und lichtmikroskopischer Bilder. In den rasterelektronenmikroskopischen Untersuchungen zur Morphologie des Eileiterepithels zeigten sich die deutlichsten Veränderungen während des Zyklus und der Trächtigkeit im Bereich der Ampulle und des Infundibulums. Im Isthmus treten in allen untersuchten Stadien kaum Veränderungen auf. Im Östrus und Metöstrus dominieren die Zilienzellen sowohl in der Ampulle, wie auch im Infundibulum. Dagegen herrschen im Diöstrus und Proöstrus in beiden Abschnitten die sekretorischen Zellen vor, welche deutlich in das Lumen hervortretende Protrusionen ausbilden. Zu Beginn der Trächtigkeit entsprechen die Befunde denen der zyklischen Stadien. Im weiteren Verlauf bleibt zunächst das Zellbild der lutealen Zyklusphase bestehen, später kommt es vor allem im Infundibulum zu einem Rückgang der Protrusionen. Der uterotubale Übergang weist beim Schwein ausgeprägte Schleimhautpolster auf. Lichtmikroskopisch ließen sich große, mehrschichtige Venen und Lymphgefäße darstellen, welche die Schleimhautpolster unterlagern und möglicherweise durch Änderungen der Blutfülle den luminalen Diameter und somit die Passageverhältnisse modulieren können. Das luminale Epithel an der UTJ zeigt eine zyklusabhängige Mehrreihigkeit und kann in Einzelfällen sogar Modifikationen hin zu mehrschichtigen Epithelabschnitten aufweisen., The purpose of the present study was to examine the morphological changes of the oviductal mucosa by scanning electron microscopy (SEM) as well as to analyse the expression of growth promoting, proliferativ pituitary hormones and their receptors using immunohistochemical and reverse transcriptase (RT)-PCR methods during estrus cycle and pregnancy. Three segments of the oviduct (infundibulum, ampulla, isthmus) were collected from 24 German Landrace sows at estrus, metestrus, diestrus, proestrus, 2.-3. day post inseminationem, 14., 23. and 65.-71. day of pregnancy. Additionaly the morphological and histological structure of the utero-tubal junction (UTJ) of the sow was demonstrated by scanning electron and light microscopy. SEM results revealed that the most obvious changes during estrus cycle and pregnancy where found in the infundibulum and ampulla. Minor changes in all stages examined were seen in the isthmus. At estrus and metestrus ciliated cells predominated in the ampulla as well as in the infundibulum. In contrast at diestrus and proestrus secretory cells increased in both segments, showing conspicious bulbous processes protruding into the oviductal lumen. In early pregnancy the morphological findings of the epithelium accord to those of the cyclic stages. During the progression of pregnancy the findings correspond to those of the luteal phase. At day 65-71 of pregnancy protrusions decline especially in the infundibulum. The UTJ of the sow is characterized by prominent polypoid processes of the mucosa. Light microscopic examinations revealed a large multilayered plexus of veins and lymphatic vessels which are located in the lamina propria mucosae of the processes, implying the modulation of the luminal diameter by variations of the bloodflow. The luminal epithelium shows cycle dependent variations in its relative height with sporadic modifications into a stratified epithelium. In the oviductal epithelium growth hormone receptors (GH-R) are expressed exclusively in ciliated cells as shown by immunohistochemical double staining with tubulin-β IV. Number of GH-R-positiv stained cells was higher in the follicular phase of the estrus cycle as well as at the beginning of pregnancy and lower in the luteal phase and late pregnancy. Prolactin receptor (PRL-R) was localized to epithelial and smooth muscel cells. Intensitiy of PRL-R staining increased during the estrus cycle and was especially high at proestrus. Generally, staining intensity of PRL-R did not show significant changes during pregnancy. Strong immunostaining of PRL-R was found in protrusions of secretory cells observed at different cycle stages and pregnancy. Immunohistochemical results are supported by RT-PCR experiments, which revealed a strong expression for GH-R as well as PRL-R in the ampulla at all stages of the estrus cycle and pregnancy examined. Using immunohistochemical and RT-PCR methods no expression of GH and PRL was found in the oviductal tissue.
Not available
Mayer, Judith
2008
German
Universitätsbibliothek der Ludwig-Maximilians-Universität München
Mayer, Judith (2008): Rasterelektronenmikroskopische und immunhistochemische Untersuchungen am Eileiter vom Schwein während Zyklus und Trächtigkeit. Dissertation, LMU München: Faculty of Veterinary Medicine
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Abstract

In der vorliegenden Arbeit wurden zum einen mit Hilfe des Rasterelektronenmikroskops die morphologischen Veränderungen des Eileiterepithels und zum anderen die Expression hypophysärer wachstums- und proliferationsfördernder Hormone und ihrer Rezeptoren immunhistochemisch und mit der Reverse Transkriptase (RT)-PCR sowohl im Verlauf des Zyklus als auch der Trächtigkeit analysiert. Hierfür wurden, von 24 Schweinen der Deutschen Landrasse, die drei Abschnitte des Eileiters (Infundibulum, Ampulle, Isthmus) in jeweils vier verschiedenen Zyklus- und Trächtigkeitsstadien untersucht. Dazu wurden Proben im Östrus, Metöstrus, Diöstrus und Proöstrus sowie am 2.-3. Tag post inseminationem, 14., 23. und 65.-71. Trächtigkeitstag entnommen. Des Weiteren erfolgte die Dokumentation des morphologischen und histologischen Aufbaus des uterotubalen Übergangs beim Schwein, anhand rasterelektronen- und lichtmikroskopischer Bilder. In den rasterelektronenmikroskopischen Untersuchungen zur Morphologie des Eileiterepithels zeigten sich die deutlichsten Veränderungen während des Zyklus und der Trächtigkeit im Bereich der Ampulle und des Infundibulums. Im Isthmus treten in allen untersuchten Stadien kaum Veränderungen auf. Im Östrus und Metöstrus dominieren die Zilienzellen sowohl in der Ampulle, wie auch im Infundibulum. Dagegen herrschen im Diöstrus und Proöstrus in beiden Abschnitten die sekretorischen Zellen vor, welche deutlich in das Lumen hervortretende Protrusionen ausbilden. Zu Beginn der Trächtigkeit entsprechen die Befunde denen der zyklischen Stadien. Im weiteren Verlauf bleibt zunächst das Zellbild der lutealen Zyklusphase bestehen, später kommt es vor allem im Infundibulum zu einem Rückgang der Protrusionen. Der uterotubale Übergang weist beim Schwein ausgeprägte Schleimhautpolster auf. Lichtmikroskopisch ließen sich große, mehrschichtige Venen und Lymphgefäße darstellen, welche die Schleimhautpolster unterlagern und möglicherweise durch Änderungen der Blutfülle den luminalen Diameter und somit die Passageverhältnisse modulieren können. Das luminale Epithel an der UTJ zeigt eine zyklusabhängige Mehrreihigkeit und kann in Einzelfällen sogar Modifikationen hin zu mehrschichtigen Epithelabschnitten aufweisen.

Abstract

The purpose of the present study was to examine the morphological changes of the oviductal mucosa by scanning electron microscopy (SEM) as well as to analyse the expression of growth promoting, proliferativ pituitary hormones and their receptors using immunohistochemical and reverse transcriptase (RT)-PCR methods during estrus cycle and pregnancy. Three segments of the oviduct (infundibulum, ampulla, isthmus) were collected from 24 German Landrace sows at estrus, metestrus, diestrus, proestrus, 2.-3. day post inseminationem, 14., 23. and 65.-71. day of pregnancy. Additionaly the morphological and histological structure of the utero-tubal junction (UTJ) of the sow was demonstrated by scanning electron and light microscopy. SEM results revealed that the most obvious changes during estrus cycle and pregnancy where found in the infundibulum and ampulla. Minor changes in all stages examined were seen in the isthmus. At estrus and metestrus ciliated cells predominated in the ampulla as well as in the infundibulum. In contrast at diestrus and proestrus secretory cells increased in both segments, showing conspicious bulbous processes protruding into the oviductal lumen. In early pregnancy the morphological findings of the epithelium accord to those of the cyclic stages. During the progression of pregnancy the findings correspond to those of the luteal phase. At day 65-71 of pregnancy protrusions decline especially in the infundibulum. The UTJ of the sow is characterized by prominent polypoid processes of the mucosa. Light microscopic examinations revealed a large multilayered plexus of veins and lymphatic vessels which are located in the lamina propria mucosae of the processes, implying the modulation of the luminal diameter by variations of the bloodflow. The luminal epithelium shows cycle dependent variations in its relative height with sporadic modifications into a stratified epithelium. In the oviductal epithelium growth hormone receptors (GH-R) are expressed exclusively in ciliated cells as shown by immunohistochemical double staining with tubulin-β IV. Number of GH-R-positiv stained cells was higher in the follicular phase of the estrus cycle as well as at the beginning of pregnancy and lower in the luteal phase and late pregnancy. Prolactin receptor (PRL-R) was localized to epithelial and smooth muscel cells. Intensitiy of PRL-R staining increased during the estrus cycle and was especially high at proestrus. Generally, staining intensity of PRL-R did not show significant changes during pregnancy. Strong immunostaining of PRL-R was found in protrusions of secretory cells observed at different cycle stages and pregnancy. Immunohistochemical results are supported by RT-PCR experiments, which revealed a strong expression for GH-R as well as PRL-R in the ampulla at all stages of the estrus cycle and pregnancy examined. Using immunohistochemical and RT-PCR methods no expression of GH and PRL was found in the oviductal tissue.